Русская Википедия:MCherry
Шаблон:Заголовок со строчной буквы
mCherry — белок, входящий в группу мономерных красных флуоресцентных белков mFruits. Его природный белок-предшественник DsRed (RFP) был выделен из кораллов рода Discosoma отряда морских анемон[1]. В отличие от DsRed mCherry является мономерным белком и его флуоресценция более стабильна, чем у его природного предшественника. Флуоресцентные белки применяются как клеточные метки для биологических исследований с помощью флуоресцентной микроскопии. mCherry поглощает свет в районе 540—590 нм и испускает свет в районе 550—650 нм[2]. mCherry входит в семейство флуорецентных белковых флуорофоров, использующихся для экспериментальной визуализации генов и анализа их функций. Редактирование генома позволило с высокой точностью вводить эти флуоресцентные тэги в геном многих модельных организмов[3].
Разработка
Красный флуоресцентный белок DsRed, выделенный из морской анемоны Discosoma, является тетрамерным белком[1]. Именно на его основе было создано большинство красных флуоресцентных белков. Однако, кроме относительно сложной тетрамерной структуры, DsRed обладает также низкой фотоустойчивостью к облучению и продолжительным временем созревания. Первоначально из DsRed был получен производный мономерный флуоресцентный белок mRFP1. Далее в ходе направленной эволюции канадским биологом Робертом Кемпбелом из Альбертского университета был получен белок второго поколения mCherry[1]. В дальнейшем из mRFP1 были также получены аналогичные белки с различными спектрами флуоресценции (т. н. mFruits), обладавшими, кроме мономерной структуры, также высокой фотостабильностью, более быстрым созреванием, высокой устойчивостью к различной кислотности среды. mCherry обладает спектрами с наиболее длинноволновыми максимумами поглощения и эмиссии в группе, но более низким квантовым выходом по сравнению с mRFP1[1].
Структура
Ген mCherry содержит 711 пар оснований[4]. Белок включает 236 аминокислот, молекулярная масса 26,7 кДа[5]. В 2006 году была разрешена кристаллическая структура белка[6]. Вторичная структура mCherry включает 3 альфа-спирали и 13 β-складчатых слоёв, которые образуют β-цилиндр третичной структуры. Хромофор mCherry образуется из метионина-66, тирозина-67 и глицина-68, которые в процессе пост-трансляционной модификации формируют производнное имидазолинона[1]. Конъюгация пи-электрона придаёт белку поглощение и эмиссию с красным сдвигом[7]. Хромофор образуется из аминокислот, входящих в альфа-спираль, и локализуется внутри β-цилиндра, что защищает хромофор от окрущающей среды[7]. В целом окружение хромофора в mCherry более гидрофобная, чем в родительском белке DsRed[8]. Оба конца белка были сделаны по подобию GFP, что позволяет вводить его во многие опытные системы и модели[1].
Третичная структура белка похожа на структуру зелёного флуоресцентного белка (GFP)[9].
См. также
- Красный флуоресцентный белок
- Зелёный флуоресцентный белок
- Жёлтый флуоресцентный белок
- Флуоресценция в биологических исследованиях
Примечания
Ссылки
