Русская Википедия:Электрофорез белков
Электрофоре́з белко́в — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых макромолекул различного молекулярного веса в стационарном электрическом поле. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является электрофорез белков в полиакриламидном геле по Шаблон:Iw[1][2].
Варианты метода электрофореза белков
Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии и молекулярной биологии) в различных областях[2]:
- Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды)
- Электрофорез с подвижной границей
- Зональный электрофорез без поддерживающей среды
- Зональный электрофорез в поддерживающей среде с капиллярной структурой
- Электрофорез белков в крахмальном геле[3]
- Электрофорез белков в полиакриламидном геле (ПААГ)[4]
- Электрофорез белков в агарозном геле
- Электрофорез на фильтровальной бумаге
- Электрофорез белков на ацетат-целлюлозной мембране
- Электрофорез в колонках и блоках гранулированной поддерживающей среды
- Капиллярный электрофорез
Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез[5], препаративный и аналитический, а также электрофорез Шаблон:Iw и электрофорез в присутствии детергента (в денатурирующих условиях). Разновидностью метода электрофореза являются изоэлектрическое фокусирование и изотахофорез. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про иммуноэлектрофорез.
В зависимости от конструкции электрофоретического Шаблон:D-l различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.
История и области применения
После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, в том числе пионером электрофореза — нобелевским лауреатом Арне Тиселиусом[6], существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработки зонального электрофореза в крахмальном геле, которую осуществил Оливер Смитис, впоследствии также нобелевский лауреат[3][7]. Метод совершенствовался[8][9] и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.
В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ[4], в 1962 году — метод диск-электрофореза[10], в 1969 году — применение денатурирующих агентов (SDS)[11]. В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов бактериофага T4[1]. В 1975 году появился двумерный (2D) электрофорез[5].
Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальных[1][3][12], так и прикладных[13][14][15][16][17]. Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в протеомике одним из методов изучения протеома[18].
См. также
- Протеом
- Электрофорез
- Электрофорез белков в полиакриламидном геле
- Электрофорез в полиакриламидном геле
Примечания
Литература
- Vesterberg O. History of electrophoretic methods // Шаблон:En2. — 1989. — Vol. 480. — P. 3—19.Шаблон:Ref-en
Ссылки
- ↑ 1,0 1,1 1,2 Шаблон:Cite pmidШаблон:V
- ↑ 2,0 2,1 Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — Шаблон:М.: Наука, 1981. — 288 с.
- ↑ 3,0 3,1 3,2 Шаблон:СтатьяШаблон:V
- ↑ 4,0 4,1 Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ 5,0 5,1 Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Шаблон:КнигаШаблон:Ref-enШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Ornstein L., Davis B. J. Disc Electrophoresis. — Шаблон:En2, USA: Distillation Products Industries, Eastman Kodak Co., 1962.Шаблон:Ref-en
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Hunter R. L., Merkert C. L. Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295.Шаблон:Ref-en
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web
- ↑ Шаблон:Cite conferenceШаблон:Ref-en
- ↑ Шаблон:Cite conference Шаблон:Webarchive
- ↑ Шаблон:Cite conference Шаблон:Webarchive
- ↑ Шаблон:СтатьяШаблон:V Шаблон:Cite web