По данным на 1859 год, караимский молитвенный дом в Екатеринославе находился в наёмном каменном здании[1][2]. Официальное утверждение кенассы последовало в соответствии с предписанием Екатеринославского губернского правления от 15 апреля 1887 года за № 22. К приходу кенассы относились караимы, проживающие в Екатеринославе, станицах Каменской и Урюпинской[3]. Строительство каменного здания кенассы в мавританском стиле началось 8 мая 1887 года на Железной улице на участке, принадлежавшем караимской общине[4].
С 1882 по 1911 год екатеринославским газзаном служил Самуил Шемарьевич Пигит (1849—1911) — караимский законоучитель, проповедник и писатель, автор сборника проповедей и стихотворений «Иггерет Нидхе Шемуэль»[5].
В октябре 1911 года из кенассы были похищены ценные предметы культа: «5 серебряных верхних украшений свитков закона, 18 серебряных лампад, 2 серебряных подсвечника, 1 серебряный канделябр, серебряные графин, бокал и указатель»[6].
В два часа дня Его Преосвященство, в сопровождении газзана А. Катыка, габбая Эля и встречавших на вокзале лиц, прибыл в Кенасу, поклонился выстроившимся шпалером членам Общины и направился к Алтарю, где его встретил и. об. Настоятеля Общины А. И. Леви приветственным словом и молитвой при участии организованного М. И. Шакаем хора. Гахам совершил молебствие о даровании победы Русскому Воинству и ниспослании благополучия Временному Правительству[7].
»
— Анонимус
В 1930 году кенасса была закрыта и передана театру рабочей молодёжи (ТРАМ). Впоследствии в здании кенассы размещались различные конторы: в 1936 году — «Радгосппостачання», городской профком «Днепропищеторга», в 1942 году, во время немецкой оккупации, — столовая, в 1951 году — контора и склад «Сортоовощ». К концу 1960-х годов кенасса находилась в стадии сноса. Ныне на её месте находится правое крыло здания Облпотребсоюза[4].